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#RNA提取#

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    Zymoresearch 10天前 北京

    RNA提取方案的新方法,替代TRIzol处理完成氯仿分层,保证RNA完整性又简易操作! #分子生物学# 核酸提取#RNA提取# TRIZOL 北京·环球影城 Zymoresearch的🎞︎微博视频

  • 维真生物 116天前 济南

    提取RNA时如何摆脱RNA酶污染?#RNA提取# #RNA酶污染# RNA酶是导致RNA降解的主要物质,广泛存在且稳定,可耐受多种处理(如煮沸、高压灭菌等)而不被灭活。RNA酶催化的反应一般不需要辅助因子,因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解,进而直接影响RNA分析结果。在所有R ...全文

  • 芽芽芽吖吖吖吖 311天前 南昌

    发现颜色越好看,毒性越大,提取一次RNA,寿命都要缩短一年#RNA提取# #不想上班不想上班#

  • 新西康生信分析科研中心 870天前 太原

    RNA提取常见问题分析: 1. 得率低: ① 样品裂解或匀浆处理不彻底 ② RNA沉淀未完全溶解 A260/A280<1.65 : ① 检测吸光度时,RNA样品没有溶于水,而溶于了TE中。低离子浓度和低pH值条件下A280值偏高 ② 样品匀浆时加的试剂量太少 ③ 匀浆样品时未在室温放置5分钟 ④ 吸取水相时混入了有机相 ...全文

  • 新西康生信分析科研中心 871天前 太原

    RNA 提取的“基操”! 操作步骤: 1. 匀浆处理: ① 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10%。 ② 单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用 ...全文

  • 新西康生信分析科研中心 876天前 太原

    RNA提取问题(5)——「黑化的」DNA DNA 的存在会使基于 UV/VIS 的定量方法(如 Nanodrop)发生偏差,从而人为地提高 RNA 的定量,使其高于实际水平。在更敏感的下游应用(例如 RNA-seq)中,DNA 还可能导致错误读数,这样的 DNA 简直就是「黑化的」了! 这种问题可以通过 TRIzol 相分离、DNA 去除柱 ...全文

  • 新西康生信分析科研中心 876天前 太原

    RNA提取问题(4)——RNA「难产了」 RNA 的产量和质量也是另无数人头疼的问题,最佳方法是保证样品完全裂解,但相同的裂解方案换了一个样本可能就没辙了。 为了提高裂解效果,可以将裂解缓冲液与机械裂解步骤(研磨珠破碎)匹配,或者在裂解液上游加入酶裂解步骤(如蛋白酶 K、溶菌酶等)。 ...全文

  • 一起实验生信科研中心 876天前 太原

    RNA提取(5)——常见问题分析3 DNA污染: ① 样品匀浆时加的试剂量太少 ② 样品中含有有机溶剂(如乙醇,DMSO等),强缓冲液或碱性溶液 蛋白聚糖和多糖污染:沉淀RNA的过程中作以下改进可去除这些污染,步骤7中,每使用1ml TRIzol在水相中加0.25ml异丙醇和0.25ml高盐溶液(0.8M柠檬酸钠和1.2M NaCl) ...全文

  • 一起实验生信科研中心 876天前 太原

    RNA提取(4)——常见问题分析2 RNA降解: ① 组织取出后没有马上处理或冷冻 ② 待提取RNA的样品没有保存于-60至-70℃,而保存在了-5至-20℃ ③ 细胞在用胰酶处理时过度 ④ 溶液或离心管未经RNase去除处理 ⑤ 电泳时使用的甲醛pH值低于了3.5#生物信息学# #生信分析# 生物信息学#RNA提取#

  • 一起实验生信科研中心 877天前 太原

    RNA提取(3)——常见问题分析1 1. 得率低: ① 样品裂解或匀浆处理不彻底 ② RNA沉淀未完全溶解 A260/A280<1.65 : ① 检测吸光度时,RNA样品没有溶于水,而溶于了TE中。低离子浓度和低pH值条件下A280值偏高 ② 样品匀浆时加的试剂量太少 ③ 匀浆样品时未在室温放置5分钟 ④ 吸取水相时混入了 ...全文

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